外泌体是直径为30-150 nm的小细胞外囊泡。在生理和病理条件下,几乎所有类型的细胞都可以释放外泌体,在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用。外泌体天然存在于体液中,包括血液,唾液,尿液和脑脊液等,内部含有其来源细胞的核酸,蛋白等物质,因此基于外泌体的疾病诊断和治疗方法得到了深入的研究。但是如何拿到纯净的外泌体一直是外泌体研究所面临的难题之一,因此研究人员也开发了许多外泌体分离的方法,来一起看一下吧。
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切向流过滤(TFF)在外泌体研究中的应用
切向流过滤(TFF)是一种过滤技术,其特点是液体流动方向与过滤方向垂直。这种技术在外泌体研究中具有du特的优势,因为它不会直接挤压外泌体,而是通过轻柔的切向作用流过滤膜,从而减少对外泌体等柔性囊泡的破坏,保证其完整性1。
TFF技术在外泌体分离中的应用主要体现在其能够高效、无损地分离外泌体。东南大学刘松琴教授团队开发了一种基于双切向流(DTFF)的微流控分离装置,该装置结合了双切向技术和两种孔径的纳米多孔膜,能够高效分离和富集直径在30 nm至200 nm之间的外泌体12。这种装置通过构建两种不同尺寸的分离界面,限定待分离生物囊泡的上下限,从而提高了分离效率,防止了膜的堵塞1。
00001. 无损分离:TFF技术通过轻柔的切向作用流过滤膜,减少了对外泌体等柔性囊泡的破坏,保证了其完整性1。
00002. 高效分离:双切向流过滤装置通过增加滤液与纳米多孔膜的接触面积,提高了分离效率,防止了膜的堵塞2。
00003. 操作简便:与超速离心(UC)相比,TFF技术操作简便,时间更短(<120分钟),且纯度更高(82.8%),回收率显著提高(77.8%)。
基于TFF技术的微流控装置在临床应用中显示出良好的前景。从不同疾病患者血清中分离出的外泌体的蛋白质组学分析结果显示,该方法能够提供更丰富的疾病相关信息,证明了其在未来临床上的实用性2。
综上所述,切向流过滤技术在保证外泌体完整性的同时,提高了分离效率,具有广泛的临床应用前景。